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xtt法原理和步骤?
[基本原理]
XTT比色法有Scudiero等首次***用,用于检测细胞增殖。XTT是异种与MTT类似的四唑氮衍生物,可被活细胞线粒体脱氢酶还原成水溶性的棕色甲肷产物,当XTT与电子偶合剂共同使用时,甲肷的生成量与细胞的增殖程度呈正相关。
[试剂及材料]
(1)XTT:用60℃预热培养液配制成6.6mmol/L,过滤除菌,现配现用。
(2)吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS):用PBS配制成220mmol/L,4℃避光保存20天。
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(3) XTT/PMS:XTT与PMS按1:1混合(临用时混合)。
[操作方法]
(1)***增殖反应同前;
(图片来源网络,侵删)
(2)于终止培养前2h,每孔加入XTT/PMS 20μl,混匀后再培养2h;
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